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外泌體在肺病進程中的作用：肺病細胞來源外泌體（LCC-exosome）可以通過刺激一些病癥血管的形成來促進一些病癥的生長。據(jù)相關(guān)報道稱，LCC-exosome中的miR-210可以通過調(diào)節(jié)基質(zhì)細胞中酪氨酸受體激酶A3的含量，促進一些病癥血管的生成；而LCC-exosome中的miR-23a則可以通過啟動脯氨酰羥化酶及壓制緊密結(jié)合蛋白ZO-1來促進肺病的生血管作用。此外，有研究發(fā)現(xiàn)，外泌體中的內(nèi)容物可以觸發(fā)上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）。晚期肺病患者血清中外泌體波形蛋白表達增加，促使人正常支氣管上皮細胞出現(xiàn)EMT，從而使肺支氣管正常上皮細胞出現(xiàn)增殖，遷移能力。色譜法。這種方法分離到的外泌體在電鏡下大小均一，但是需要特殊的設(shè)備，應(yīng)用不普遍。超速離心法是目前外泌體相關(guān)文章中的主流方法，由于離心步驟繁瑣。太原外泌體提取試劑廠家推薦

外泌體的生物學(xué)功能研究中需要分離完整的外泌體顆粒，而傳統(tǒng)超速離心方法步驟繁瑣、硬件要求高、操作難度大。李記生物自主開發(fā)的外泌體快速提取試劑盒，組分經(jīng)過優(yōu)化處理，適用于細胞培養(yǎng)上清液、血清、血漿、尿液及其他體液（腦脊液、腹水、羊水、乳汁以及唾液等）中的外泌體提取，并搭配純化過濾裝置，可快速高效地獲得高純度外泌體顆粒。注意事項：1.對于待測樣品粘度過大時，可將樣本用4℃預(yù)冷的1×PBS緩沖液進行等體積稀釋處理。2.當(dāng)血清、血漿、唾液等樣品收獲的外泌體濃度較高，收獲的外泌體顆粒無法通過EPF柱純化時，可用4℃預(yù)冷的1×PBS進行稀釋后再通過EPF柱離心。3.針對外泌體標(biāo)志蛋白（CD63,CD9,CD81等）進行Westernblot檢測，可以鑒定所提的外泌體。通過超速離心(120000g/分鐘)20小時以上才能獲得足夠的外泌體量天津外泌體提取試劑廠家現(xiàn)貨外泌體提取：高速離心以消除更大的囊泡。

研究中研究人員發(fā)現(xiàn)，胃病細胞周圍富含TAM。TAM以M2極化表型為特征，并促進胃病細胞在體外和體內(nèi)的遷移。此外，研究人員發(fā)現(xiàn)M2衍生的外泌體決定了TAMs介導(dǎo)的遷移活動。通過使用質(zhì)譜方法，研究人員確定載脂蛋白E（ApoE）是M2巨噬細胞衍生的外泌體中高度特異性和有效的蛋白質(zhì)。ApoE是一種M2特異性且高度豐富的來源于M2外泌體的蛋白質(zhì)，是決定胃病細胞遷移潛力的主要驅(qū)動因素。然而，來自ApoE-/-的小鼠M2巨噬細胞的外泌體在體外和體內(nèi)對胃病細胞的遷移沒有顯著影響。在機制上，M2巨噬細胞衍生的外泌體介導(dǎo)ApoE啟動的PI3K-Akt信號通路，并在TAM和受體胃病細胞之間進行細胞間轉(zhuǎn)移，促進細胞骨架的遷移。總的來說，該研究發(fā)現(xiàn)外泌體介導(dǎo)的功能性ApoE蛋白從TAM轉(zhuǎn)移到一些病癥細胞，促進了胃病細胞的遷移。

外泌體的提取方法，先用含無外泌體血清的培養(yǎng)基對人脂肪來源間充質(zhì)干細胞進行饑餓培養(yǎng)，這樣可使干細胞處于正常生長狀態(tài)，不會被克制生長增殖，其所分泌的外泌體所包含的有效物質(zhì)也更貼近其自然狀態(tài)下的外泌體，然后將含有外泌體的培養(yǎng)上清液進行低速差速離心(即先一離心處理、再第二離心處理)以去除細胞及其碎片，用100kd超濾管對低速差速離心后的離心液進行超濾濃縮得到外泌體濃度更高的超濾液，將超濾液經(jīng)過第三離心處理去除雜質(zhì)后直接用0.22μm過濾器過濾除菌，過濾掉粒徑為220nm以上的物質(zhì)，進一步得到含顆粒粒徑小于220nm的濃縮液，因超濾濃縮處理和第三離心處理使得液體量濃縮，這樣過濾除菌效率得到較大提高，較后將濃縮液進行超速離心的第四離心處理分離提取到外泌體。該外泌體的提取方法，既結(jié)合了差速離心，又結(jié)合了超濾和超速離心，通過該提取流程，較終可高效地從人脂肪來源間充質(zhì)干細培養(yǎng)上清液中提取到高濃度、高純度的外泌體，具有操作簡單、成本低，適合產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)的特點。這些試劑盒不需要特殊設(shè)備，隨著產(chǎn)品不斷更新?lián)Q代，提取效率和純化效果逐漸提高。

外泌體的提取主要包括以下幾種方式：一是超速離心法，這是目前外泌體提取較常用的方法。此種方法得到的外泌體量多，但是純度不足，電鏡鑒定時發(fā)現(xiàn)外泌體聚集成塊，由于微泡和外泌體沒有非常統(tǒng)一的鑒定標(biāo)準(zhǔn)，也有一些研究認為此種方法得到的是微泡不是外泌體。二是過濾離心，這種操作簡單、省時，不影響外泌體的生物活性，但同樣存在純度不足的問題。三是密度梯度離心法，用此種方法分離到的外泌體純度高，但是前期準(zhǔn)備工作繁雜，耗時，量少。四是免疫磁珠法，這種方法可以保證外泌體形態(tài)的完整，特異性高、操作簡單、不需要昂貴的儀器設(shè)備，但是非中性pH和非生理性鹽濃度會影響外泌體生物活性，不便進行下一步的實驗。五是PS親和法，該方法將PS（磷脂酰絲氨酸）與磁珠結(jié)合，利用親和原理捕獲外泌體囊泡外的PS。該方法與免疫磁珠法相似，獲得的外泌體形態(tài)完整，純度較高。由于不使用變性劑，不影響外泌體的生物活性，外泌體可用于細胞共培養(yǎng)和體內(nèi)注射。2016.9《ScientificReports》雜志發(fā)表了該方法較新數(shù)據(jù)，表明PS法可提取相當(dāng)高純度的外泌體。六是色譜法，這種方法分離到的外泌體在電鏡下大小均一，但是需要特殊的設(shè)備，應(yīng)用不普遍。是一種用于一些病癥診斷和預(yù)后監(jiān)測的非常理想的新型生物標(biāo)記物一些疾病的早期診斷。正規(guī)外泌體提取試劑直銷廠家

外泌體提取：尺寸排阻色譜。尺寸排阻色譜是基于大小而非分子量實現(xiàn)分離大分子。太原外泌體提取試劑廠家推薦

外泌體（Exosomes）是細胞分泌到胞外的一種囊泡（ExtracellularVesicles，EVs），其大小為30-150nm，具有雙層膜結(jié)構(gòu)和茶托狀形態(tài)，含有豐富的內(nèi)含物（包括核酸、蛋白和脂質(zhì)等），參與細胞間的分子傳遞。外泌體普遍存在于細胞培養(yǎng)上清以及各種體液中，包括血液、唾液、尿液、乳汁等，同時也存在于組織樣本中，如腦組織、肌肉組織、脂肪組織等。腦組織分離方法簡述：將腦組織剪成薄片，放入離心管中加上消化液進行消化，經(jīng)水浴、反復(fù)輕輕上下顛倒，再用移液間斷緩慢吹吸至消化結(jié)束。隨后加入培養(yǎng)基于消化液中，混勻，置于冰上。再進行一系列的差速超速離心過程，包括除雜、濾膜過濾、超離等。較后用PBS重懸外泌體，用重懸后的外泌體進行下面的透射電鏡（TEM）、納米粒徑追蹤分子（NTA）和markerWB鑒定。來源于細胞內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體，經(jīng)多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中太原外泌體提取試劑廠家推薦